Гениталната херпесна инфекция (HSV, HSV) е широко разпространена в целия свят и епидемиологичните проучвания показват увеличаване на нивото на инфекция навсякъде. Генитален херпес е една от причините за язвени поражения на гениталиите. Херпесната инфекция е провокирана от видове HSV 1 или HSV-2 Повечето случаи на генитален херпес са свързани с HSV-2, но се има предвид и инфекцията и HSV-1. Клиничната картина на първия епизод на генитален херпес при пациенти с HSV-1 и HSV-2 инфекции е сходна и тежестта на рецидивите е по-малка при HSV-1, отколкото с HSV-2. В допълнение, тежестта на първия епизод и реактивацията с инфекция с HSV-2 е по-ниска при пациенти с предишен HSV-1. Трябва да се отбележи, че повечето от херпесните инфекции са асимптоматични или недиагностицирани. Херпесната инфекция може да изглежда нетипична, което затруднява поставянето на диагноза. Повечето случаи на предаване на вируса на партньор или от майка на новородено се случват при липса на клинични симптоми. Проведени са проучвания, които показват, че HSV увеличава риска от HIV инфекция. Антивирусната терапия намалява клиничните прояви на HSV, което значително намалява риска от предаване.
Важно еДиагностицирането на херпес е важно за определяне на тактиката на управление, но херпесните тестове не са включени в скрининговите проучвания..
Има много начини за откриване на HSV, а клиничната диагноза на гениталния херпес трябва винаги да се подкрепя от лабораторни тестове, включително серотипи, тъй като серотипът засяга както прогнозата, така и схемата на лечение.. Окончателната диагноза на гениталния херпес се установява въз основа на визуализация на специфични признаци в гениталната област, с освобождаване на вируса или с откриване на антиген. В някои лаборатории, откриването на HSV ДНК чрез молекулярно-диагностични методи замества изолирането на вирусната култура и диагностиката на ELISA. Серологични тестове се провеждат при пациенти със симптоми на херпесна инфекция, когато директните методи показват отрицателни резултати, при липса на симптоми и за определяне на минала или настояща инфекция..
Следните аспекти влияят на резултатите от лабораторната диагностика на HSV:
- вид на изпитването;
- качество на пробата,
- лабораторни възможности;
- тълкуване на резултатите.
Директни методи
Пробите, получени от везикулозни лезии през първите 72 часа от появата им, имат голяма диагностична стойност. Ако има висок риск от HSV, се извършват други биоматериали от по-ранна лезия или изследване на генитални мазки. Ако корите се появят на фона на заздравяването, вероятността за откриване на HSV е значително намалена. Използването на агресивни агенти за дезинфекция на лезии може да инактивира вируса. Лечението с калциев алгинат е вредно за HSV и следователно не е приложимо..
Директните тестове потвърждават наличието на HSV в съмнителен фокус или в секрети от гениталиите. В идеалния случай се анализира проба от везикула, която се появи преди по-малко от 24 часа..
Ако има много мехурчета, аспирирайте съдържанието на няколко. Според проучванията чувствителността на анализа е по-ниска при пациенти с рецидивиращи лезии, отколкото при пациентите с първите епизоди.
В някои случаи електронната микроскопия на течен биоматериал може да даде положителен резултат. Тази процедура, макар и бърза, е относително нечувствителна и положителните резултати се появяват само при външни лезии (обрив по бедрата, по-рядко върху лигавиците). За предпочитане е течностите за анализ да се вземат от цялата везикула с помощта на туберкулинова спринцовка, докато аспирацията на съдържанието е достатъчна..
Капката се изсушава на въздух и се изследва с микроскоп..
Някои лаборатории използват молекулярни методи за откриване и типизиране на HSV. Пробите, взети за изолиране или откриване на антиген, също са подходящи за методи за откриване на ДНК. Повишената чувствителност на PCR диагностиката, основана на амплификация на нуклеинови киселини, в сравнение с други директни методи (откриване на култура или антиген), позволява да се анализира материала с минимален брой патогенни частици.
Стандартна вирусна култура
Засяването на хранителна среда е златен стандарт за откриване на HSV, специфичността е 100% за HSV-1 и HSV-2, чувствителността зависи от стадия на херпесната инфекция и времето на получаване на пробата.
Чувствителността варира от 75% за първите епизоди до 50% за пристъпите..
RIF в херпес
Откриването на HSV антиген чрез оцветяване с DFA мази (флуоресценция) може да осигури бързо определяне на клетъчната култура. Важно е да се получи висококачествена проба за този анализ; в този режим чувствителността на теста може да достигне 90%, особено по време на първоначалната инфекция.
Материалът се оцветява със специална флуоресцентна субстанция, последвана от микроскопия.
Откриването на вирусен антиген е алтернатива на диагностичния метод на културата, метод, който може да помогне, когато неправилно обработване и транспортиране на проби, всеки наличен вирус може да бъде инактивиран.
За потвърждение на HSV чувствителността на анализа е подобна или по-висока от тази на методите за култивиране..
Откриването на HSV антигени е възможно при използване на DFA тестове или тестове на имунопероксидаза върху фиксирани и третирани клетъчни проби..
Dzank намазка
Херпесната инфекция причинява типични цитопатични промени в гениталните епителни клетки). Те се увеличават по размер, появяват се вътрешноядрени включвания и често се визуализират многоядрени клетки. След специално оцветяване, пробите се изследват с помощта на светлинен микроскоп..
Недостатъци: този метод има ниска чувствителност и не прави разлика между HSV-1 и HSV-2. Освен това подобна картина може да бъде например при варицела.
Необходими са по-чувствителни тестове, за да се потвърди диагнозата..
Електронна микроскопия
Директно изследване на везикуларна течност или друг клиничен материал с помощта на електронна микроскопия за диагностициране на HSV е ограничено от факта, че морфологията на вируса също не позволява да се различи HSV от други херпесни вируси (например, варицела-зостер вирус). Този традиционен метод е до голяма степен заменен от флуоресцентно оцветяване с намазка, което осигурява специфичен тип диференциация за HSV-1 и HSV-2.
Детекция на ДНК вируса
Вирусната ДНК може да бъде открита чрез хибридизационни методи, като се използват радиоактивно белязани или биотинилирани проби. Тези методи до голяма степен са заместени от по-чувствителни и по-малко продължителни изследвания, които използват амплификация на целевата HSV ДНК чрез полимеразна верижна реакция (PCR). Специфичността на амплификационния метод се осигурява или чрез провеждане на повторна PCR диагностика с целеви специфични праймери, или чрез използване на HSV-специфична хибридизация с амплифицирани продукти..
В случай на възможен генитален херпес, PCR открива вирусната ДНК в рамките на няколко дни, след като лезията не съдържа демонстративен инфекциозен вирус. Това означава, че диагностичен метод, основан на амплификация на нуклеинова киселина, може да доведе до положителен резултат, дори когато е настъпило симптоматично възстановяване и лечението вече не е необходимо..
Отрицателните резултати от засяването обикновено се потвърждават чрез PCR диагностика. Чувствителността на PCR е по-висока от стандартната култура. Появата на PCR в реално време минимизира риска от фалшиво-положителни резултати..
Косвени серологични анализи
Около 8-10 ml кръв се събира в епруветка без антикоагулант или консерванти. След като коагулира при стайна температура, серумът се центрофугира и се поставя в друга епруветка. Ако е необходимо съхранение за няколко седмици, серумът се охлажда при 4 ° С или замразява при температура под -20 ° С. Не се препоръчва да се замразява цяла кръв поради хемолиза, което прави пробата неподходяща за серологично изследване..
Анализът за откриване на антитела към HSV се предписва, когато други вирусологични изследвания не могат да бъдат извършени или да дадат отрицателни резултати). Това е особено вярно за асимптоматична инфекция..
Серологични тестове за HSV могат да се прилагат в следните случаи:
- проучване на предаването на херпесна инфекция на партньор;
- първия епизод на инфекция, особено при бременни жени;
- повтарящ се HSV;
- изследване на несъответстващи двойки,
- планиране на бременността (мъжът е положителен, жената е отрицателна);
- Обременена акушерска и гинекологична анамнеза със съмнение за херпесна инфекция;
- скрининг за ППИ;
- скрининг при HIV-инфектирани пациенти за откриване на HSV-2.
Въпреки че много серологични тестове откриват антитела към HSV, не е възможно да се установи специфичен тип (1 или 2).
Налице е тясна серологична връзка между HSV-1 и HSV-2, всяка от които кодира серологично различен гликопротеин G (gG-1 и gG-2). Тази разлика се използва при разработването на специфични за определен тип серологични тестове..
ELISA, имуноблотинг
Имуноблотинг (WB) е стандарт за откриване на антитела към HSV. Тестовете имат висока чувствителност и способност за разграничаване на антитела от HSV-1 и HSV-2. Реакцията протича с освобождаването на фиксирани протеинови матрици ("blots") от лизатите на HSV-1 или HSV-2 клетки.
Най-голямата диагностична стойност е дефиницията на IgM антитела, които се появяват приблизително 2 седмици след заразяването или присъстват в кръвта по време на хронична инфекция или нейното активиране..
IgG се определя от дългосрочното съществуване на инфекция в организма или при неговото активиране.
Важно еМетодът ELISA може да бъде количествен (определяне на титър на антитела, по-висок, по-остър процес) и качествено (наличие на вирус, тип, антитела, предишни рецидиви).
Откриването на антитела към вирусовите протеазни преднимани помага да се прецени продължителността на процеса.
Дешифриращ анализ на ELISA за херпес:
- IgM "-", IgG до "+" предхождащи протеини, IgG късно "+" / първична остра инфекция или рецидив.
- IgM "-", IgG към преждевременни протеини "-", IgG късно "+" / имат имунен отговор към херпесен вирус (носител).
- IgM "+", IgG до "+" предшестващи протеини, късен IgG "-" / първична остра инфекция.
- IgM "+", IgG до "+" предшестващи протеини, IgG късно "+" / първична остра инфекция.
- IgM "-", IgG към преждевременните протеини "-", IgG късно "-" / норма, което показва липсата на патологичен процес.
Тестване на съпротивлението
Има редица антивирусни лекарства за лечение на HSV инфекции; повечето от тях се предписват ацикловир. Резистентността на HSV към ацикловир нараства и почти всички клинично значими щамове, резистентни към ацикловир, се диагностицират при имунокомпрометирани пациенти, особено тези, които са заразени с HIV. Развитието на резистентност обикновено настъпва в резултат на мутации в вирусния геном и наличието на селективен ефект на лекарството води до стабилна популация от вируси. Изолирането на HSV от персистиращи лезии, въпреки адекватните дози, е подозрително към резистентност към ацикловир.
Какви заболявания се използват за диференциална диагностика на херпес?
Диференциалната диагноза се извършва със следните патологии:
- Синдром на Бехтех (неинфекциозен васкулит, характеризиращ се с орогенитални афтозни язви, увреждане на кожата и очите, и включване на ЦНС, стомашно-чревния тракт и ставите);
- кандидоза;
- мек шанкър;
- Вирус на Coxsackie;
- херпес зостер;
- сифилис;
- Болест на Crohn;
- някаква дерматоза;
- ингвинален гранулом и др..
Мишина Виктория, уролог, медицински рецензент